河南师范大学关于ARTP（常压室温等离子体）诱变育种系统项目单一来源采购公示

河南师范大学申请ARTP（常压室温等离子体）诱变育种系统采用单一来源方式采购，现公示如下：

一、拟成交供应商的名称

北京思清源生物科技有限公司

二、拟提供货物或服务项目基本情况

      ARTP有变育种系统能够在常压、室温条件下产生等离子体进而对细胞进行诱变，诱变过程中不需要抽真空、无需高压电源，实验温度为20-30度，因而能够对液体悬浮液细胞进行诱变，避免了其他诱变仪器由于抽真空而损伤大量细胞，等离子体穿透力强，照射细胞后可以产生活性粒子作用于生物大分子，引起DNA多样性突变。另外仪器操作简便，对人体安全无辐射，运行成本低廉。

该仪器可用于动物、植物、微生物细胞的诱变育种，同时可以用于高效构建基因突变库及辅助分子生物学技术获得高产菌株。该仪器的购置可以为我校微生物学科研究人员提供菌种改良的有力工具，也为生物技术应用性项目的研发提供平台，因而会成为常年不间断使用的高效运转仪器。

三、单一来源原因及相关说明

该仪器为国内生产、国际上唯一的独家生产的专利产品，因此只有北京思清源生物科技有限公司这一家生产，国内外诱变育种系统有离子束诱变系统等，但无等离子体诱变系统，而离子束诱变的最大不便之处在于高压抽真空会引起细胞变形和损伤，仪器庞大，操作很不方便，运行成本太高，仪器总成本也太高。总体来说，ARTP诱变系统的主要优势如下：

1. 相对于分子生物学构建菌株的方法，ARTP高效、运行成本低、操作简捷、无需专业高端人才；

2. 相对于传统的诱变方法，ARTP有更高的突变率和正突变率，使更容易通过较少的筛选工作获得目标菌株。并且由于ARTP对于遗传物质独特的作用机理，使突变的种类也更加丰富。

3. ARTP对环境无污染，保证操作者的人身安全。

ARTP使用实例：

目前，此设备已经在清华大学、北京大学、华东理工大学、江南大学、天津科技大学、山东大学、南京工业大学、河南大学、河北大学等多个高校院所使用，并发表了一系列的论文可供参考使用。国内也有数家制药厂（江苏江山制药、湖北广济制药、浙江升华拜克、宁夏泰瑞制药等）使用此设备，效果很好。

ARTP 诱变应用实例：

细菌：

1.提高阴沟肠杆菌耐盐和降解石油烃的能力：处理条件：功率120W、间距2mm、处理时间2min(致死率90%）。突变菌株对培养基中的盐有很高的耐受性，而野生型菌株在含盐培养基上几乎无法生长。传代15次保持相同的生长特性，有良好的遗传稳定性。突变菌株对石油烃的降解能力远高于野生型菌株，尤其在高盐环境中。

2. 选育高产丁醇芽孢杆菌：ARTP（处理90s）与NTG的复合诱变。获得产量提高24.5%的突变株。

3. 选育高产氢气产气肠杆菌：正突变率10%、产氢量提高26.4%。处理条件：功率100W、气量15SLM、时间3min（致死率98.9%）。

4. 选育高产丁醇贝氏梭状芽孢杆菌：丁醇产量72小时内10.4g/L，突变株无论采用蔗糖或木糖或葡萄糖/木糖/阿拉伯糖的混合物作为碳源产量都几乎一致。处理条件：功率100W、气量10SLM、时间180s（致死率90%）。

5. 选育高产琥珀酸谷氨酸棒状杆菌：在致死率92%的条件下正突变率达到22%，处理条件：功率100W、气量10SLM、处理时间30~180s。经连续传代5次发酵验证，均保持良好遗传稳定性。40g/L葡萄糖能够产琥珀酸15.6g/L、乳酸22.8g/L。

6. 提高凝结芽孢杆菌木糖利用能力高产乳酸：乳酸产量达到82.3g/L，糖酸转化率92.37%，较出发菌株乳酸产量提高了21.5%，糖酸转化率提高了16%。处理条件：功率100W、气量10SLM、时间60s（致死率83%）。

7. 选育高产高脯氨酸嗜醋酸棒杆菌：在照射4min致死率99%的条件下，筛选得到脯氨酸产量提高20.29%的突变株。

8. 高产率生产L-乳酸拟干酪乳杆菌：突变株A6生长速度快,延迟期较短,产酸特性优于出发菌株。经摇瓶验证,在含有126 g/L葡萄糖的发酵培养基中,发酵结束时间为30 h,产酸120g/L,糖转化率达95%,产酸速率4.00 g/L/h, 产酸量提高 14.21%,产酸速率提高42.35%。处理条件：功率120W、气量8SLM、时间：45s（致死率97.9%）

9. 诱变筛选铜绿假单胞菌高产鼠李糖脂菌株：等离子体与其他方法复合多轮诱变，筛选出一株PZA1高产突变株，其鼠李糖脂产量达到4.7 g/L。经过正交试验优化培养基，鼠李糖脂最高产量可达到6.7 g/L，且传代后产量稳定。

10. 快速诱变高产苏氨酸的突变株：相比出发菌株，在相同的发酵培养条件下，1905#突变株鲁棒性较好、生长速率加快，能耐受更低的pH值。糖代谢速率加快，产酸强度提高，苏氨酸浓度提高了99.6%。经50 次传代，遗传性稳定。处理条件：功率115W、气量10SLM、时间：1min（致死率99.3%）

放线菌：

1.      提高阿维链霉菌阿维菌素B1a的产量：正突变率21%、阿维菌素产量提高30%。处理条件：功率120W、间距2mm、处理时间1、2、3（致死率98.2%）、5min。

2. 选育高产多聚赖氨酸白色链霉菌：正突变率26%、产量提高31.6%、在相同培养条件下产量为野生型菌株的4倍。处理时间6min（致死率86.1%）。

3. 选育高产盐霉素白色链霉菌：突变率高达54.8%,正突变率为26.0%。结合高通量筛选平台,筛选到三株高产突变株S-3、S-9和S-11,相对于出发菌株,其摇瓶发酵效价分别提高了57.6%、45.5%和69.7%。并通过传代实验验证这三株菌具有良好的遗传稳定性。处理条件：功率120W、气量10SLM、时间5min（致死率84.7%）。

4. 选育多杀菌素高产菌株：通过ARTP 诱变，并结合生物检测快速方法进行高通量筛选，获得遗传稳定高产突变株，多杀菌素发酵产量比出发菌株提高32.29%。

霉菌

1.选育谷氨酰胺转胺酶高产菌株茂源链轮丝菌：突变率42.8%、正突变率20.6%，酶活提高82%。处理条件：气量12SLM、间距2mm、处理时间1、2、3、4、5、6min。

2.结合分子生物学技术提高黑曲霉产脂肪酶的比活力：转化子脂肪酶酶活最高达36U/mL，酶活力提高约37%

3.提高好食脉孢菌汽爆麦秆利用能力高产纤维素酶：获得酶活是出发菌株2倍的突变株。

4.提高三孢布拉氏霉菌产番茄红素产量：番茄红素产量提高了56.63%，负菌正突变性十分显著。正、负菌变异系数分别为2.08%和2.41%，正、负菌稳定性均很好，不易退化。处理条件：气量10SLM、功率100W、时间3min（致死率85%）

5. 提高绿色木霉菌纤维素酶的产量：ARTP与其他诱变方法（UV、离子注入等）结合的复合诱变处理，获得一株相对活力最高的突变株，纤维素酶活是出发菌株的1.97倍。

酵母：

1.对产油圆红冬孢酵母的快速诱变：处理条件：功率115W、气量10SLM、间距2mm。在致死率为99%的条件下获得的以突变株增殖速度为指标的突变率47.2%、正突变率达到27.2%，产油量为原菌株的2.2倍。

2.诱变木糖代谢产油圆红冬孢酵母：处理条件：功率115W、气量10SLM、间距2mm、时间210s。突变株培养120h后产油脂量达到43.42%,为原菌株的2.22倍。

3.红法夫酵母虾青素高产菌株的诱变：处理时间2 min，虾青素的产量约为1.67mg/L，较出发菌株提高了40%，虾青素含量为224.6 μg/g，较出发菌株提高了42%。并对其传代培养7 代，菌株稳定。

4.低产甲醇酿酒酵母菌株的诱变：ARTP同紫外、硫酸二乙酯诱变方法进行比较，其中只有ARTP诱变菌株的酒样甲醇含量低于出发菌株且酒精度高于出发菌株。其酒精度比原出菌株高出23.0%；甲醇的绝对含量比出发菌株低21.2%；甲醇的相对含量比出发菌株低36.0%。

5.低产甲醇酿酒酵母菌株的诱变：对出发菌株进行第一次ARTP诱变，获得突变株酒精度比原出菌株提高28.9%，甲醇相对含量降低17.1%；再次进行ARTP处理，能够在前一步诱变选育菌种的基础上再进一步降低甲醇的生成量，甲醇相对含量比出发菌株降低了77.0%。

6.诱变近平滑假丝酵母高产木糖醇：等离子体诱变时间4 min，筛选出的菌株发酵生产木糖醇产量为73.28 g/L，比未诱变组产量提高了26.6%，且残糖很少。与紫外诱变相比，经过紫外诱变后的菌株木糖醇产量提高了21.78%，没有达到等离子体诱变之后的效果。

藻类：

1.      构建螺旋藻突变体库及选育高糖产量的突变株：处理条件：气量12.5SLM、间距2mm、时间60s（致死率70%以上）。突变株呈现出不同产糖能力，其中约有30%的突变株产糖能力明显高于野生型。

四、其它需要公示的内容

公示期限从2014年6月10日起至2014年6月16日止。

潜在政府采购供应商对公示内容有异议的，请于公示期满后2个工作日内以实名书面（包括联系人、地址、联系电话）形式将意见反馈至财政厅政府采购监督管理处（联系电话：65808411）和河南师范大学（地址：新乡市建设东路46号，联系人：张老师，联系电话：0373-3326193）                                                                         

附件：技术参数及专家论证意见 [点击下载]

                                                                                            2014年6月10日